Cre-LoxP系统是基于位点特异性重组的一种基因编辑技术，主要由Cre重组酶和LoxP位点组成。Cre重组酶（Cyclization recombination enzyme）是一种由噬菌体P1产生的38kDa DNA重组酶，由343个氨基酸构成。Cre重组酶能够精确识别LoxP位点的特定DNA序列，并介导两个LoxP位点之间的DNA重组。LoxP位点由34bp的序列构成，含有两个13bp的反向回文序列和一个8bp的中间间隔序列。反向回文序列是Cre重组酶的特异性结合位点，而间隔区域则决定了LoxP位点的特异性，两个LoxP位点之间的相对方向则决定了重组的类型。

Cre-LoxP系统的显著优势在于其高效性和特异性，能够在活体动物中实现精确的基因敲除、插入、翻转和易位等多种基因操作。自20世纪80年代末被首次描述以来，这一系统在基因功能研究、疾病模型构建以及神经科学等领域得到了广泛应用。当基因中存在LoxP位点且Cre重组酶存在时，Cre重组酶会特异性识别LoxP位点两端的反向重复序列，并与之结合形成二聚体。此后，形成的二聚体与其他LoxP位点的二聚体结合，进一步形成四聚体。接着，Cre重组酶对LoxP位点之间的DNA序列进行切割，产生DNA断裂，最终通过DNA连接酶的作用实现重新连接，从而完成重组过程。

根据LoxP位点的方向和位置，Cre重组酶可介导以下几种基因操作：

• 删除：若两个LoxP位点位于同一DNA片段的两端且方向一致，Cre酶可切除这两个位点之间的DNA片段。
• 翻转：当两个LoxP位点处于同一DNA片段的两端且方向相反时，Cre酶可介导这两个LoxP位点之间的序列翻转。
• 易位：若两个LoxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre酶会诱导两条DNA链或染色体发生易位。
• 交换：若四个LoxP位点分布在两条不同的DNA链或染色体上，Cre酶可诱导LoxP间的序列互换。

此外，自Cre-LoxP系统被发现以来，科学家们进行了多项优化，研发出多种突变版本，以提高其在不同生物体和条件下的应用效率和特异性。例如，通过对LoxP位点序列的改造，衍生出Lox2272、Lox511、Lox5171、LoxN等变体，这些变体不仅在不同生物体中展现更高的识别和切割效率，还能通过组合使用实现更复杂的基因重组。

尊龙凯时的LSL（LoxP-Stop-LoxP）系统是一种基于Cre-LoxP系统的条件性基因表达工具，其设计核心在于将一个由LoxP位点包围的终止盒插入目标基因上游。Cre重组酶存在时，LoxP位点之间的DNA序列（包含终止盒）将被切除，解除对目标基因的转录阻断，使其在特定启动子的驱动下表达。

此外，FLEX（Flip-Excision）系统通过在目标基因两侧设计两对不同方向或类型的LoxP位点，允许Cre重组酶先翻转基因片段方向，再切除特定序列，实现基因表达的双向调控。DIO（Double-Floxed Inverted Orientation）系统则针对FLEX进行了优化，使得目标基因的开放阅读框（ORF）在Cre重组酶的作用下翻转，一旦翻转后便无法再次翻转，从而实现稳定的基因表达。

在DO（Double-Floxed Orientation）系统中，目标基因的开放阅读框被设计为正向排列，且两侧由LoxP和Lox2272位点包围。在缺乏Cre重组酶的情况下，目标基因能正常表达；而当Cre重组酶存在时，目标基因会被翻转，进而抑制基因表达。

尊龙凯时提供多种Cre-LoxP系统病毒工具，涵盖DIO、DO、FLEX等系统，支持基因干扰、过表达、神经示踪、光遗传学、化学遗传学及钙成像等多种调控及检测功能。若您对此感兴趣或需了解更多产品服务，欢迎咨询我们！请访问我们的店铺，探索更多优质的产品与服务。